酶联免疫吸附法检测与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检验中应用对

【摘要】 目的 探讨酶联免疫吸附法(ELISA)检测与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)在梅毒检验中应用对比情况。方法 500例梅毒标本, 均采用ELISA与TRUST检测, 比较检测结果。结果 ELISA血清阳性率高于TRUST(P<0.05), ELISA检测结果的敏感性、特异性、阴性预测值、阳性预测值均高于TRUST(P<0.05)。结论 ELISA梅毒准确性较高, 适用于大批量样本筛查。 
  【关键词】 酶联免疫吸附法;甲苯胺红不加热血清试验;梅毒;对比 
  DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.010 
  Application comparison between enzyme linked immunosorbent assay and toluidine red unheated serum reagin test in syphilis detection LIANG Fu-quan, ZHU Xiu-lan, PENG Jian-hua. Department of Inspection, Dongguan Third People’s Hospital, Dongguan 523320, China 
  【Abstract】 Objective To investigate application of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and toluidine red unheated serum reagin test (TRUST) in syphilis detection. Methods A total of 500 syphilis samples were inspected by ELISA and TRUST, and their detection outcome was compared. Results ELISA showed higher serum positive rate than TRUST (P<0.05), and its sensibility, specificity, negative and positive predictive value were all higher than those of TRUST (P<0.05). Conclusion Due to high accuracy in syphilis detection, ELISA is suitable for large sample screening. 
  【Key words】 Enzyme linked immunosorbent assay; Toluidine red unheated serum reagin test; Syphilis; Comparison 
  梅毒属于性传播疾病的一种, 随着我国改革开放的发展, 婚育观念的变化, 梅毒发生率呈现明显增高的趋势[1, 2]。梅毒是由于梅毒螺旋体感染造成的, 其传播途径可以分为性传播和母婴传播, 妊娠梅毒可能造成流产、死胎、胎儿畸形等严重的并发症, 因而对于梅毒进行快速、准确的诊断成为重要的公共卫生问题之一[3, 4]。本研究通过对本院梅毒检验标本情况进行分析, 拟探讨对比ELISA与TRUST在梅毒检验中应用情况, 现将结果报告如下。 
  1 资料与方法 
  1. 1 一般资料 选取本院2014年1月~2015年12月梅毒标本500例进行分析, 所有标本是通过筛查妊娠期梅毒孕妇, 年龄21~41岁, 平均年龄(26.8±11.2)岁, 病程1~5周, 平均病程(2.3±1.4)周, 初产妇408例, 经产妇92例, 孕早期210例, 孕中期200例, 孕晚期90例。 
  1. 2 方法 检查对象空腹采集静脉血5 ml, 静置后分离血清。ELISA:采用全自动酶联免疫分析仪(芬兰雷勃有限公司, Multiskans MK3)进行检测, 相关操作按照试剂说明书严格执行, 样品OD值S/CO≥1表示梅毒抗体为阳性, 样品OD值S/CO<1为梅毒抗体阴性。TRUST:试剂主要来自上海荣盛神武有限公司, 取50 μl血清在卡片的圆圈中进行涂布, 将抗原轻轻摇匀, 通过9号针头滴加1滴抗原, 通过水平旋转仪旋转卡片8 min, 在亮光下观察结果。TRUST阳性标本通过0.9%氯化钠溶液进行倍比稀释, 测定反应素, 将可以引起阳性反应最高的稀释度作为反应素的滴度, 再通过明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确认, 一般以圆圈内出现红色或者粉色絮状物作为阳性, 以圆圈内可见甲苯胺红颗粒聚集中央一点或者均匀分布作为阴性。 
  1. 3 观察指标 ①观察两种方法检测梅毒患者血清阳性率情况。②观察两种方法检测结果评价情况, 主要包括敏感性、特异性、阴性预测值、阳性预测值情况。 
  1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。 
  2 结果 
  2. 1 血清阳性率 ELISA血清阳性率高于TRUST(χ2=7.68, P<0.05)。 
  2. 2 检测结果评价 ELISA检测结果的敏感性、特异性、阴性预测值、阳性预测值均高于TRUST(χ2=7.68、6.11、4.31、12.18, P<0.05)。 
  3 讨论 
  梅毒螺旋体是梅毒感染的病原体, 其侵入人体之后会产生抗菌体的特异性抗体和抗心磷脂抗的非特异性抗体, 因非特异性抗体的检出时间比较晚, 在一期梅毒早期、晚期梅毒和潜伏期梅毒、梅毒治疗后检出率相对较低, 甚至于可能呈现阴性结果[5]。对于菌体的特异性抗体, 出现早, 消失晚的规律, 临床上以以特性抗体作为梅毒螺旋体感染的诊断依据。本院常用的梅毒检测方法主要有ELISA与TRUST, 其中TRUST应用的抗原多是心磷脂类, 其检测结果很容易受到主观因素的影响, 但是其操作方便, 价格低廉, 在基层医院开展较容易。ELISA是利用梅毒螺旋体特异性抗原将酶标板孔包被, 利用双抗原夹心法的原理对血清中特异性抗体进行检测, 减少了主观性判定的误差, 将结果判定依据定位酶标仪读数, 从而提高了检出率。TRUST可以对梅毒感染进行初步筛查, 其反应素的滴度测定比较方便, 初期梅毒病灶出现1~2周后反应素就可以测出, 二期梅毒患者的滴度最高, 随着发展三期梅毒逐步降低, 因反应对于集体没有保护作用。ELISA酶的纯度高, 催化反应转化率较高, 性质稳定, 专一性较强, 灵敏度较高, 通过ELISA可以同时对血清中梅毒抗体免疫球蛋白(Ig)G和IgM进行检测, 对于梅毒抗体若阳性标本也可以检出, 其可以将酶化学反应的敏感性和抗原性反应有机的结合起来。本研究通过对500例梅毒标本进行分析, 均采用ELISA与TRUST检测。结果表明, ELISA血清阳性率高于TRUST, ELISA检测结果的敏感性、特异性、阴性预测值、阳性预测值均高于TRUST, 提示ELISA在检测梅毒标本中效果优于TRUST。另外有资料显示, ELISA与TRUST在梅毒检验中侧重点不是十分相同, TRUST往往注意临床治疗效果和预后效果的判定, 而ELISA除了准确性相对较高以外, 还适用于大批量样本的筛查, 在临床应注意结合具体情况进行方法的选择。 
  参考文献 
  [1] 刘冰. 酶联免疫吸附法检测梅毒抗体与甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体结果对比分析.河南预防医学杂志, 2015, 26(5):377-378. 
  [2] 郭家权, 洪敏, 林永前, 等.酶联免疫吸附法检测与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检验中应用价值的比较.广东医学, 2014, 35(5):738-740. 
  [3] 丁国良, 商发奎, 延义芹, 等.采供血机构对梅毒螺旋体检测的最佳方案探讨.国际输血及血液学杂志, 2014, 37(3):222-225. 
  [4] 姚家奎, 丁德坤, 孙蓉, 等.应用多种方法检测老年患者梅毒抗体的探讨与分析.国际检验医学杂志, 2012, 33(19):2376-2378. 
  [5] 陈述文, 梁连辉, 蔡常辉, 等.四种方法检测早期梅毒螺旋体感染的临床应用评价.国际检验医学杂志, 2012, 33(21):2633-2634. 
浏览次数:  更新时间:2016-07-07 14:14:08
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